一区二区三区久久99精品,成人av综合亚洲一区二区,日本一区二区不卡视频播放,中文字幕人成人乱码亚洲影

技術(shù)文章您的位置:網(wǎng)站首頁 >技術(shù)文章>細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)這三個步驟就能搞定!
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)這三個步驟就能搞定!
更新時間:2025-05-21   點(diǎn)擊次數(shù):11次

一、細(xì)胞復(fù)蘇

將凍存細(xì)胞從液氮中取出后,在37C水浴鍋內(nèi)不斷搖動促進(jìn)其融化。移人15ml離心管中,加入10m預(yù)熱的DMEM培養(yǎng)基,輕輕吹

勻,離心,2000rpmX2min,棄上清液。

加入10mIDMEM培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入10mIDMEM培養(yǎng)基,輕輕吹打,接種于10cm盤中,在含5%CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

二、細(xì)胞傳代

細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時,去培養(yǎng)基,10mIPBS清洗2次。加入3mI含0.25%EDTA,放人細(xì)胞培養(yǎng)箱3min。加人1mIDMEM

培養(yǎng)基終止消化,轉(zhuǎn)移至15ml離心管。

加入10mIPBS清洗細(xì)胞培養(yǎng)盤,轉(zhuǎn)移至15ml離心管,2000rpmX2min,棄上清液。再加入10mIPBS(經(jīng)高壓滅菌,保存于40C),吹

勻,吸取10微升進(jìn)行計數(shù),按照1×106/盤接種,在含5%CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

三、細(xì)胞凍存

細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時,去培養(yǎng)基,10mIPBS清洗2次。加入3ml含0.25%EDTA,放人細(xì)胞培養(yǎng)箱3min。加入ImIDMEM

培養(yǎng)基終止消化,轉(zhuǎn)移至15ml離心管。加入10mIPBS清洗細(xì)胞培養(yǎng)盤,轉(zhuǎn)移至15ml離心管,2000rpmX2min,棄上清液。

加入Iml凍存液(90%血清,10%DMSO),放入凍存盒內(nèi)(盒內(nèi)有異丙醇,以保證溫度降低的速度),立即放入一80C冰箱內(nèi),過夜,

第二天放入液氮中,可以保存至少兩年,如不放人液氮,可以保存三個月。

凍存液的配制:70%的培養(yǎng)基+20%FBS+10%DMSO.DMSO要慢慢滴加,邊滴邊搖。

進(jìn)入細(xì)胞間開始細(xì)胞培養(yǎng)時,必須嚴(yán)格按照下列步驟操作:

①確定所有的細(xì)胞操作用的溶液和耗材都已經(jīng)消毒并檢測沒有問題,不確定的溶液和耗材請勿使用,除非特殊情況,不要借用別人的溶

液。

②確定衣服的袖口已經(jīng)卷起或者白大褂的袖口已經(jīng)扎緊。

進(jìn)入細(xì)胞間開始細(xì)胞培養(yǎng)時,必須嚴(yán)格按照下列步驟操作:

①確定所有的細(xì)胞操作用的溶液和耗材都已經(jīng)消毒并檢測沒有問題,不確定的溶液和耗材請勿使用,除非特殊情況,不要借用別人的溶

液。

②確定衣服的袖口已經(jīng)卷起或者白大褂的袖口已經(jīng)扎緊。

③確定酒精燈內(nèi)的酒精量,需要的話及時進(jìn)行補(bǔ)充。

④確定所有需要用到的溶液和耗材都放在伸手可及的位置。為了方便單手開啟瓶蓋,實(shí)驗(yàn)開始可以把所有瓶蓋旋松。

③盡量不要直接傾倒溶液,除非瓶口沒有被燒壞。如果傾倒失敗,溶液粘在瓶口,請用噴過75%酒精的紙巾仔細(xì)清潔瓶口周圍(不要接

觸到瓶口)后在火焰上簡單燒灼。

操作時如果不能肯定所用的耗材是潔凈的,必須及時更換。

實(shí)驗(yàn)完畢及時收拾,保持工作區(qū)域清潔整齊,后用75%酒精清潔臺面。

網(wǎng)站首頁 關(guān)于我們 新聞中心 產(chǎn)品中心 聯(lián)系我們
備案號:滬ICP備12045995號-12   GoogleSitemap   技術(shù)支持:智慧城市網(wǎng) 管理登陸
© 2018 上海酶聯(lián)生物科技有限公司(www.szkdaf.com) 版權(quán)所有 總訪問量:833119
精品国产日韩一区二区三区| 亚洲最大的中文字幕在线| 夜夜骚av无码| 久久久久久久久久久久久艹| 欧美激情网一区二区三区| 中文字幕在线精品视频入口一区 | 99久久精品费精品蜜臀av| 日本免费高清一区二区三区| 日韩高清一区二区视频在线| 亚洲欧美人高清精品a∨| 国产精品久久久久久区三区| 好男人好资源影视在线| 亚洲精品国产精品乱码不卡√| 色窝窝影视一区二区三区| 国内精品久久久久久白浆| 国产成人亚洲精品无码青| 色妞www精品免费视频| 成人18禁网页在线观看| 亚洲男人的天堂2021| 亚洲一区二区三区同男男| 色88久久久久高潮综合影院| 精品国产99久久免费观看| 亚洲 欧美 日韩 成人| 亚洲无码一级片在线播放| 精品久久久久久人妻字幕| 国产伦一区二区三区视频| 99精品欧美一区二区三| 国产精品第一页久久91| 亚洲午夜久久久久噜噜噜| 99久久久无码国产精品免费砚床| 國產精品久久久久久吹潮| 极品久久久久久久久久三情| 国产成人综合久久亚洲精品| 熟妇人妻无码xxx视频| 成人av视频免费在线看| 亚洲阿v2017在线观看| 日日噜噜噜夜夜爽亚洲精品| 精品一区二区超碰久久久| 亚洲自拍第一页另类视频| 欧美一区二区三区高清网站| 黄色大片成人免费在线观看|