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人非小細胞肺癌細胞(A549)

人非小細胞肺癌細胞(A549)

產(chǎn)品時間:2019-04-11

簡要描述:

人非小細胞肺癌細胞(A549)通過與部門的合作,不斷增加產(chǎn)品資源,擴大本身的產(chǎn)品儲備,從而有效解決了廣大客戶尋找產(chǎn)品難的問題,公司全體人員將與各屆同仁一起,攜手共進,為發(fā)展細胞產(chǎn)品貢獻一份力量。

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人非小細胞肺癌細胞(A549)
細胞介紹:
該細胞系由DJ.Griad通過肺癌組織移植培養(yǎng)建系,患者為58歲白人男性。A549能通過胞苷二磷酸膽堿途徑合成含有高含量不飽和脂肪酸的卵磷脂。
 
本公司的細胞培養(yǎng)操作規(guī)程,供參考
1)培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1.準備F-12K培養(yǎng)基(F-12K,GIBCO),90%;胎牛血清,10%。
2.培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37°C,培養(yǎng)箱濕度 為70%-80%。
3.凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
2)細胞處理:
復(fù)蘇細胞:將含有l(wèi)mL細胞懸液的凍存管迅速放入37°C水浴中(水面要低 于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入lmL培 養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
 
人非小細胞肺癌細胞(A549)對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。力口 2m丨消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37°C培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部 分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細胞的 培養(yǎng)基終止消化。輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入lmL培養(yǎng)液后吹勻。移入到事先準備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng) 基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
 
細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,先要消化處理并進行細胞計數(shù)。消化方法按照細胞傳代方法的1-3步驟進行,后的重懸液使用血清。懸浮細胞直接計數(shù)后離心,用血清重懸浮,加DMSO至終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每lml的數(shù)量分配到凍存管中。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。
 
注意事項:
收到細胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰己揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染, 請立即與我們電聯(lián)
所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作, 并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
 
細胞特性:
1)來源:肺癌
2)形態(tài):上皮細胞樣,貼壁生長
3)含量:>lxl06 個/mL
4)污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規(guī)格:T25瓶或者lmL凍存管包裝
 
人非小細胞肺癌細胞(A549)細胞接受后的處理:
1.收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2.請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37°C培養(yǎng)約 2-3h〇
3.棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4.如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附 帶的*培養(yǎng)基。
5.接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉秒娐?lián)。
細胞用途:僅供使用。
  

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